在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中，容易受到多種因素的影響造成污染，細(xì)胞污染不能被消除，但可以采取各種措施進(jìn)行預(yù)防和處理。細(xì)菌污染便是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染的常見(jiàn)現(xiàn)象之一。

一、細(xì)菌污染原因分析

細(xì)胞的細(xì)菌污染主要有以下幾種：

1. 革蘭氏陽(yáng)性菌：大腸桿菌、枯草桿菌、假單胞菌等；

2. 革蘭氏陰性菌：白色葡萄球菌等。

細(xì)菌污染細(xì)胞后，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的培養(yǎng)液變渾濁、ph發(fā)生改變、有刺鼻氣味等，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，影響正常實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。因此在發(fā)生細(xì)菌污染后，應(yīng)第一時(shí)間調(diào)查原因，及時(shí)解決問(wèn)題，避免污染進(jìn)一步擴(kuò)大。

細(xì)胞發(fā)生細(xì)菌污染的常見(jiàn)原因有：

1. 人員：人員在操作規(guī)程中沒(méi)有按規(guī)定穿戴好無(wú)菌服和手套、口罩、頭套等防護(hù)用品；

2. 儀器：培養(yǎng)皿、吸管、細(xì)胞培養(yǎng)箱等設(shè)備儀器在使用前沒(méi)有進(jìn)行滅菌或滅菌過(guò)程中存在死角；

3. 培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基的配制過(guò)程中人員裸手接觸培養(yǎng)基；培養(yǎng)基的高溫滅菌過(guò)程中溫度和壓力沒(méi)有達(dá)到滅菌要求；培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)瓶密閉不嚴(yán)；

4. 規(guī)章制度：規(guī)章制度的制定過(guò)程中有漏洞，忽視了某些操作環(huán)節(jié)的滅菌重要性；

5. 環(huán)境：環(huán)境的日常滅菌頻次低、滅菌不充分、沒(méi)有選擇合適的滅菌方法等。

二、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)從哪些方面入手做好細(xì)菌防控

在日常的實(shí)驗(yàn)中需對(duì)操作人員多加監(jiān)督檢查，確保穿戴符合規(guī)范，并完善相應(yīng)的規(guī)章制度，便于日常指導(dǎo)人員操作。培養(yǎng)基在高溫滅菌過(guò)程中溫度和壓力應(yīng)達(dá)到規(guī)定要求；在進(jìn)行培養(yǎng)前仔細(xì)檢查培養(yǎng)瓶是否按要求進(jìn)行包扎；定期檢查滅菌設(shè)備，確保設(shè)備管道沒(méi)有泄漏，設(shè)備處于正常使用期限內(nèi)。

針對(duì)儀器和環(huán)境主要有以下幾種滅菌方法：

1. 物理滅菌：主要指紫外線滅菌，通過(guò)紫外線作用于細(xì)菌的DNA，干擾細(xì)菌DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄從而殺死細(xì)菌。紫外線滅菌具有高效、廣譜的優(yōu)點(diǎn)，但容易在滅菌過(guò)程中留有死角，并且隨著使用時(shí)間的增長(zhǎng)紫外線的穿透力會(huì)逐漸減弱，且會(huì)對(duì)人體健康造成一定的危害。

2. 化學(xué)滅菌：包括臭氧滅菌、消毒劑滅菌等。

①臭氧滅菌：臭氧滅菌可殺滅細(xì)菌、病毒、孢子等微生物，且作用迅速、不容易產(chǎn)生二次污染、經(jīng)濟(jì)性?xún)r(jià)比高，但需注意臭氧的使用需在一定的濃度范圍內(nèi)，否則也會(huì)危害人體健康，對(duì)人體的呼吸道和消化道有一定的刺激作用；

②消毒劑滅菌：常用的消毒劑主要有75%乙醇、過(guò)氧化氫、新潔爾滅、殺孢子劑等。消毒劑可大規(guī)模噴灑擦拭，不留死角。值得注意的是75%乙醇、過(guò)氧化氫和新潔爾滅無(wú)法殺滅孢子等耐受力強(qiáng)的微生物，殺孢子劑可以殺滅孢子等耐受力強(qiáng)的微生物，但需按照對(duì)應(yīng)的比例使用才能達(dá)到更好的消毒效果。

三、消毒劑該如何選擇

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T27405-2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢測(cè)》中對(duì)消毒劑有如下規(guī)定：

針對(duì)實(shí)驗(yàn)室選擇消毒劑時(shí)，需同時(shí)具備紫外線和臭氧滅菌高效、廣譜的優(yōu)點(diǎn)，還應(yīng)盡可能地?zé)o污染，對(duì)儀器設(shè)備等基本無(wú)腐蝕性，同時(shí)不危害人體健康，便于人員操作。奧克泰士幫您解決細(xì)菌、孢子污染實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞的問(wèn)題。

奧克泰士消毒劑主要的活性物質(zhì)是過(guò)氧化氫和微量的銀離子，經(jīng)奧克泰士處理后的物體表面中銀離子的含量極其微量不可見(jiàn)且無(wú)毒，不會(huì)對(duì)環(huán)境產(chǎn)生二次污染。由過(guò)氧化氫分離的元素氧可直接攻擊微生物的細(xì)胞壁，破壞細(xì)胞壁使銀離子與微生物的酶結(jié)合，從而使微生物失去活性，殺菌率可達(dá)99.999%。奧克泰士可有效殺滅大腸桿菌、葡萄球菌、孢子、真菌等實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)污染源，為實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)提供安全保障。

四、日常防控措施

實(shí)驗(yàn)室發(fā)生細(xì)菌污染時(shí)，不僅會(huì)影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)污染環(huán)境，危害人體健康，因此選擇合適的消毒方法定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展消毒滅菌工作至關(guān)重要。同時(shí)應(yīng)制定并執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生管理制度，確保實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的清潔和衛(wèi)生；定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清潔和消毒處理，包括桌面、地面、設(shè)備等；加強(qiáng)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的衛(wèi)生教育和監(jiān)督管理，從日常入手做好細(xì)菌防控。